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1 乳酸菌抗氧化能力比較
1.1 乳酸菌對(duì)DPPH 自由基的清除能力
由表2可知，18株乳酸菌的菌體細(xì)胞和無細(xì)胞提取物均呈現(xiàn)一定的DPPH自由基清除能力，但清除能力較弱且差異不大，清除范圍為4.71%-18.91%。本實(shí)驗(yàn)18株乳酸菌中，L8、L13和L18菌體細(xì)胞的DPPH自由基清除率較強(qiáng)，L9無細(xì)胞提取物的DPPH自由基清除率較強(qiáng)，與其余菌株相比差異顯著(p＜0.01) 。
1.2 乳酸菌對(duì)羥自由基的清除能力
由表3可知，18株乳酸菌的菌體細(xì)胞和無細(xì)胞提取物均呈現(xiàn)一定的羥自由基清除能力且差異較大，清除范圍為2.32%-34.89%。L4、L9和L15這3株乳酸菌對(duì)羥基自由基清除能力較強(qiáng)，其中L4無細(xì)胞提取物羥基自由基清除率高達(dá)34.89%，相當(dāng)于0.40mg/mL VC，與其他菌株差異顯著(p＜0.01)。乳酸菌具有較強(qiáng)的羥自由基清除能力主要是因?yàn)槿樗峋?xì)胞內(nèi)存在螯合Cu2+和Fe2+的天然物質(zhì)，能夠從根本上減少羥自由基。
1.3 乳酸菌對(duì)超氧陰離子的清除能力
由表4可知，18株乳酸菌的菌體細(xì)胞和無細(xì)胞提取物均呈現(xiàn)一定的超氧陰離子自由基清除能力，但清除能力較弱且差異不大，清除范圍為5.36%-28.78%。L8、L12這2株乳酸菌對(duì)超氧陰離子自由基清除能力較強(qiáng)，其中L12的無細(xì)胞提取物的超氧陰離子自由基清除率為28.78%，相當(dāng)于0.20mg/mL VC，與其他菌株差異顯著( p＜0.01)。
1.4 乳酸菌的還原力
由表5可知，僅有3株乳酸菌的無細(xì)胞提取物不具有還原力，其他乳酸菌菌體和無細(xì)胞提取物均檢測(cè)出一定的還原能力，但還原力差異較大。其中L5、L15和L18這3株菌菌體細(xì)胞和無細(xì)胞提取物的還原力均在20%以上，L5還原能力最強(qiáng)，其菌體細(xì)胞和無細(xì)胞提取物的還原力分別高達(dá)86.18%和89.69%，與其他菌株差異極顯著( p＜0.01)。
2 乳酸菌的抗性能力
2.1 乳酸菌的抗酸能力
實(shí)驗(yàn)中將篩選得到的5株抗氧化能力較強(qiáng)的乳酸菌在pH=3.0的人工胃液中進(jìn)行復(fù)篩實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如表7所示，存活率在30%以上的有2株，其中L14達(dá)94.98%，與其它菌株差異極顯著(p＜0.01)。
2.2 乳酸菌在膽鹽中的耐受力
實(shí)驗(yàn)中將5株乳酸菌在質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.1%、0.2%、0.3%和0.5%的膽鹽溶液中進(jìn)行復(fù)篩實(shí)驗(yàn)，由表8可知，隨著膽鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增大，菌株的耐受力逐漸降低，5 株乳酸菌對(duì)0.5%膽鹽溶液耐受力較差。
3 優(yōu)良乳酸菌的鑒定
3.1 優(yōu)良乳酸菌的16S rDNA 分析和系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹的建立
L14的16SrDNA序列PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后，結(jié)果如圖2所示。陰性對(duì)照無條帶，說明擴(kuò)增未出現(xiàn)污染；第3泳道大約1500bp的位置有特異性擴(kuò)增片段，符合預(yù)期擴(kuò)增片段長度。通過16SrDNA序列比對(duì)分析，發(fā)現(xiàn)L14與GeneBank數(shù)據(jù)庫中已知乳酸菌具有高達(dá)100%的同源性。將菌株L14與GenBank中15株乳酸菌一起構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹，結(jié)果如圖3所示，菌株L14與副干酪乳桿菌親緣關(guān)系最近。
小結(jié)
通過對(duì)18株乳酸菌的不同組分的抗氧化活性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其抗氧化能力不同且差異顯著，其中菌株L4、L5、L8、L14、L18抗氧化能力較強(qiáng)，在菌體濃度為109CFU/mL時(shí)，L5菌體細(xì)胞和無細(xì)胞提取物的還原能力分別高達(dá)86.18%和89.69%；L14菌體細(xì)胞和無細(xì)胞提取物的抗脂質(zhì)過氧化能力分別高達(dá)62.48%和46.21%。結(jié)合抗胃酸和抗膽鹽能力最終篩選得到1株具有高抗氧化能力和抗性能力菌株L14，經(jīng)鑒定，其為副干酪乳桿菌（Lactobacillus paracasei subsp. Paracasei），有較大的深入研究價(jià)值和潛在的應(yīng)用價(jià)值。
  
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